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活细胞rna检测技术——smartflare -mg娱乐电子游戏4155

突破性的纳米创新技术,开辟rna研究新时代!

  • 无需样本制备

  • 无需 rna 扩增

  • 无需转染试剂

  • 无需细胞裂解

  • 无毒性

只要一步孵育即可直接检测活细胞内的rna!
检测完成后,探针可以从细胞中排出,细胞仍可用于下游实验分析!

smartflare™ rna“灵光”技术原理:
每个smartflare™探针都是一个纳米金颗粒上面连接着多拷贝的双链寡核苷酸序列,其中一条链(“报告链”)带有荧光集团,靠近纳米金颗粒时,荧光淬灭。当目标rna与纳米金颗粒上的“捕获链“结合时,“报告链”被释放,上面的荧光基团会发出荧光,通过荧光检测平台检测到。



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活细胞rna检测纳米技术原理视频:



smartflaretm rna“灵光”应用举例:
1) 利用胞内的rna标志物进行细胞分选,分选后的细胞仍可用于下游研究。
以mir-155为标志物进行细胞筛选:用10 ng/ml of tnf alpha 刺激mir-155高表达和低表达的细胞6小时,然后用vcam 抗体进行标记,并用流式细胞仪进行分析。
   a. mir-155低表达的细胞经过tnf alpha刺激后,vcam标记没有明显的增加。
   b. mir-155高表达的细胞经过tnf alpha刺激后,vcam标记有明显的上调。
   c. 将tnf alpha 刺激的mir-155低表达和高表达细胞结果重叠,显示mfi值有8.7倍的升高。


以mir-155为标志物筛选的细胞用tnf-alpha处理,然后用vcam 抗体标记并用流式细胞仪检测(点击放大)


2) 用流式细胞仪进行rna定量
利用smartflare™技术检测hela和mcf-7细胞中egfr的mrna水平及huvec和ht1376细胞中fgf2的mrna水平,结果显示出与定量rt-pcr很好的相关性。


smartflare™检测mrna水平和rt-pcr结果的相关性(点击放大)


3) 及时观察活细胞中目标rna的表达:
利用egfr特异的smartflare rna“灵光”显示mcf7和hela细胞中egfr的表达量不同(红色)
利用无规则序列的对照探针进行实验,在细胞中看不到任何信号(左边两幅图)。


显微镜显示egfr smartflare rna“灵光”的特异性和动力学范围


smartflaretm rna“灵光”还可以对mirnas进行定量检测,同时检测多个目标rna,在同一细胞样本中对 rna 和蛋白进行同时检测。
更多的应用期待您的探索!


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