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免疫沉淀mg娱乐电子游戏4155的解决方案 -mg娱乐电子游戏4155免疫沉淀(ip)是从复杂样品(如细胞裂解液或抽提物)中纯化特定蛋白的一种常用方法。传统的ip是采用固定了protein a或protein g的琼脂糖珠(也称为树脂)来捕获溶液中的抗原-抗体复合物。复合物继而被离心“沉淀”。这种方法在样品操作过程中比较不方便,多步漂洗和离心操作使目的蛋白得率和实验结果重现性均不甚理想;而且得到的蛋白通常没有天然活性,不能用于功能性分析。 免疫共沉淀(co-ip)是验证两种蛋白相互作用的方法,一种蛋白被特异性纯化时如果另一种蛋白也被一起纯化,说明这两种蛋白存在相互作用。其操作类似于ip,纯化中以gst、链亲和素等较常见。 默克密理博提供了不同的ip操作模式和产品,力图为您提供更多的方便并获得最理想的实验结果。 catch and release® 可逆免疫沉淀系统 catch and release® 系列ip 试剂盒采用方便的离心甩柱方法提高了ip 的操作速度、通量和重现性。其中使用的试剂使蛋白样品处于非变性条件,不仅使样品可用于下游活性功能分析,也使杂蛋白污染减少,改善了实验结果。所以catch and release® 试剂盒在多样品操作、下游要做活性分析等ip 应用中特别受欢迎。catch and release® 系列试剂盒已经应用于大量鼠或兔抗体的ip 实验,其中孵育时间比传统ip 减少,仅需30 分钟,同样得到非常好的效果。更高通量的ip 操作(一次可达96 个样品),请选用17-501 catch and release® v2.0 high throughput (ht) immunoprecipitation assay kit。 用catch and release® 试剂盒,非常方便进行免疫沉淀、纯化天然构象蛋白或变性蛋白。试剂盒已经通过许多文献的co-ip和ip-kinase实验验证! • 可逆:可非变性洗脱抗原:抗体复合物,ip的蛋白因此可接后续活性分析 • 背景低:特别的抗体捕获亲和配体(acal) 降低了非特异性结合 • 快速:最少30分钟即可完成的ip的孵育步骤 • 重复性更好:甩柱设计方便操作,并避免吸液步骤导致的样品损失 proteome系列磁珠:轻松快捷地做免疫沉淀实验 传统的ip方法需要长达数小时的孵育,激烈的离心操作。相反,pureproteome™ 磁珠ip法不仅加强了抗原-抗体结合,操作简便快速却更温和。磁珠易于混合和重悬,磁珠与蛋白之间的互作也更加高效。 pureproteome™ protein a和g磁珠与pureproteome™ protein a/g 混合磁珠 pureproteome™ protein a/g 混合磁珠由protein a 和proteing 按50:50 比例混合而成,能与所有类型的哺乳动物免疫球蛋白g(iggs)有效结合。
pureproteome™ kappa 磁珠能够非常特异地结合到人免疫球蛋白kappa 轻链恒定区上,lambda 磁珠则以好高的特异性与人免疫球蛋白lambda 轻链恒定区结合。这些新型的磁珠可以用于捕获所有亚型的免疫球蛋白(igg, iga, igd, ige 和igm),成为一种简单快捷、重复性好、便于缩放的人抗体或抗体片段(带有kappa 或lambda 轻链, 例如fab 和f(ab’ )2.)纯化的可靠方法。采用混合的pureproteome™ kappa 和lambda 磁珠可以去除所有人免疫球蛋白。 采用pureproteome™做ip的优点:
pureproteometm protein g磁珠较其它市售产品ip效果更出色与传统琼脂糖珠和i 品牌磁珠相比,pureproteometm protein g磁珠显著提高了蛋白产量而几乎没有结合背景。将一个约20kda的蛋白转染进入hek293细胞。细胞裂解液与不同体积的protein g珠子和含有这个蛋白特异性抗体的兔血清混合。4℃孵育过夜,珠子用样品缓冲液漂洗。重悬。用western blotting检测珠子上捕获的蛋白。数据承蒙华盛顿大学药学院提供(西雅图,wa)。 pureproteome™ nhs 和 carboxy flexibind 磁珠:又快又好地制备自己想要的磁珠 实际工作中并不是总能找到产品满足特别的研究要求,这时候就需要自己制备了。研究蛋白- 蛋白相互作用?将酶/ 核酸/ 小分子固定化? pureproteome™ nhs 和carboxy flexibind 磁珠提供了极大的便利,并按自己的要求固定化这些分子,只要这个分子上有一个游离的氨基基团就可以。 pureproteome™ nhs flexibind 磁珠(适合首次使用的初学者)
pureproteome™ carboxy flexibind 磁珠(适合有经验的使用者)
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